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黃曲霉毒素免疫親和柱在操作上主要分以下三個(gè)流程

更新時(shí)間:2020-12-07點(diǎn)擊次數(shù):1912
  黃曲霉毒素免疫親和柱適合于和HPLC、LC-MS及AFB1酶免分析試劑盒結(jié)合使用,定量檢測(cè)AFB1。適用于谷物、食品、茶葉、飼料、中藥材等樣本中的AFB1凈化處理,提高樣品的純度,純化后的樣品可用不同的分析方法測(cè)定。

  測(cè)定原理:
  本產(chǎn)品測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),抗AFB1的單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上,樣品中的AFB1經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢通過(guò)AFB1免疫親和柱,在免疫親和柱內(nèi),AFB1與抗體結(jié)合,洗滌液通過(guò)免疫親和柱除去未被結(jié)合的雜質(zhì)。后采用甲醇洗脫AFB1,然后進(jìn)行相關(guān)分析。

  黃曲霉毒素免疫親和柱的操作流程:
  1、樣品處理:參照GB 5009.22-2016中各法,對(duì)樣品進(jìn)行處理;
  2、凈化:以GB 5009.22-2016 為例說(shuō)明;
  a、柱子預(yù)處理:取出黃曲霉毒素免疫親和柱,恢復(fù)至室溫(22-25℃),將上端塞子取出,打開(kāi)下端堵頭,將柱內(nèi)保存液流掉至高于凝膠上界面3-5mm處,停止流液;
  b、加樣:加入處理好的樣品液過(guò)柱,打開(kāi)下端堵頭,調(diào)節(jié)流速支1-2滴/秒,棄去流出液。注:大米、玉米、小麥、花生及其制品、植物油脂:加處理好樣品15ml醬油、食醋:加處理好樣品10ml;
  c、大米、玉米、小麥、花生及其制品、植物油脂樣品淋洗:液體*排凈后,用10ml蒸餾水,淋洗2次,棄掉流 出液;醬油、食醋樣品淋洗:液體*排凈后,用10mL 0.1%的吐溫-20的PBS溶液清洗,棄掉流出液;用10ml蒸餾水,淋洗2次,棄掉流出液;
  d、吹干:利用真空設(shè)備,壓入空氣,將柱子中的水吹干;
  e、洗脫:加入1ml甲醇,調(diào)節(jié)流速為2-3秒每滴,緩慢洗脫,收集全部洗脫液。
  3、檢測(cè):凈化后樣品可直接用ELISA,熒光和高效液相等方法進(jìn)行檢測(cè)。
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