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分享使用黃曲霉毒素免疫親和柱的步驟

更新時(shí)間:2023-05-15點(diǎn)擊次數(shù):1246
  黃曲霉毒素是一種由黃曲霉屬真菌產(chǎn)生的毒素,可污染食物和飼料,并對(duì)人和動(dòng)物健康造成潛在威脅。檢測(cè)黃曲霉毒素常用方法之一是使用免疫親和柱。
 
  使用黃曲霉毒素免疫親和柱的步驟如下:
  1.將樣品處理:首先需要將樣品進(jìn)行預(yù)處理,以便將黃曲霉毒素從中提取出來。對(duì)于食品和飼料樣品,通常會(huì)使用液相色譜或高效液相色譜等技術(shù)進(jìn)行提取。對(duì)于其他樣品,可能需要采用不同的方法進(jìn)行提取。
  2.準(zhǔn)備免疫親和柱:將免疫親和柱放置于離心管或試管中,并加入一定量的洗滌緩沖液進(jìn)行平衡。這可以幫助去除免疫親和柱上的任何未結(jié)合的物質(zhì),并為后續(xù)步驟鋪平道路。
  3.加載樣品:將經(jīng)過預(yù)處理的樣品通過免疫親和柱進(jìn)行過濾。樣品中的黃曲霉毒素將與免疫親和柱上的抗體結(jié)合,而其他物質(zhì)則會(huì)被過濾掉。在加載樣品時(shí),應(yīng)該注意不要將免疫親和柱過度壓縮或堵塞。
  4.洗滌免疫親和柱:為了去除可能殘留在免疫親和柱上的非特異性結(jié)合物,需要使用洗滌緩沖液進(jìn)行洗滌。通常會(huì)進(jìn)行多次洗滌,直到流出的液體基本沒有顏色,這可以確保樣品中的黃曲霉毒素得到準(zhǔn)確檢測(cè)。
  5.洗脫黃曲霉毒素:為了將黃曲霉毒素從免疫親和柱上洗脫下來,可以使用酸性或有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫。洗脫過程涉及到 pH 值和洗脫液的濃度等參數(shù)的調(diào)整,以確保黃曲霉毒素被洗脫。
  6.檢測(cè)黃曲霉毒素:將黃曲霉毒素洗脫物移至檢測(cè)平臺(tái),如高效液相色譜儀、氣相色譜儀或質(zhì)譜儀,進(jìn)行檢測(cè)分析。此步驟的具體細(xì)節(jié)取決于所用的檢測(cè)平臺(tái)。
 

 

  在使用黃曲霉毒素免疫親和柱時(shí),應(yīng)該注意以下事項(xiàng):
  1.在操作過程中一定要戴手套,避免將雜質(zhì)和污染物帶到樣品中。
  2.對(duì)于每個(gè)樣品,都應(yīng)該使用新鮮的免疫親和柱。
  3.遵循所有操作說明,并根據(jù)需要進(jìn)行測(cè)試以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。
  4.相關(guān)設(shè)備和化學(xué)品應(yīng)妥善存放,以確保安全。
 
  總之,黃曲霉毒素免疫親和柱是一種可靠、高效的檢測(cè)技術(shù),可用于快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)食品、飼料和其他樣品中的黃曲霉毒素。
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